western blot（Western blot的原理操作及注意事项）

(资料图片仅供参考)

相信目前很多小伙伴对于Western blot的原理操作及注意事项都比较感兴趣，那么小搜今天在网上也是收集了一些与Western blot的原理操作及注意事项相关的信息来分享给大家，希望能够帮助到大家哦。

1、Lowry法：此法是双缩脲法的进一步发展。

2、他的第一步就是双缩脲反应，即Cu++与蛋白质在碱性溶液中形成络合物，然后这个络合物还原磷钼磷-磷钨酸试剂（福林-酚试剂），结果得到深蓝色物。

3、此法比双缩脲法灵敏得多，适合于测定20mg/L～400mg/L含量的蛋白质溶液。

4、其干扰物质与双缩脲法相同，而且受他们的影响更大，硫醇和许多其他物质的存在会使结果严重偏差。

5、另外要注意的是，加入福林试剂时要特别小心，试剂只在酸性pH环境中才稳定，上述提到的还原反应只有在pH10时才发生，因此，福林试剂加入到碱性的Cu2+-蛋白质溶液中时，必须立刻搅拌，以使磷钼酸-磷钨酸试剂在未被破坏之前能有效地被Cu2+-蛋白质络合物所还原。

本文到此结束，希望对大家有所帮助。